商(Shang)品(Pin)属(Shu)性(Xing)：(?)

商(Shang)品(Pin)详(Xiang)情(Qing)：(?)
别(Bie)称(Cheng) MDA-MB 361; MDA MB 361; MDA-MB361; MDAMB361; MDA-361; MDA361; MD Anderson-Metastatic Breast-361

年(Nian)龄(Ling)（(?)性(Xing)别(Bie)）(?) 40岁(Sui)

组(Zu)织(Zhi)来(Lai)源(Yuan) 乳(Ru)腺(Xian)腺(Xian)癌(Ai)；(?)源(Yuan)自(Zi)转(Zhuan)移(Yi)部(Bu)位(Wei)：(?)脑(Nao)

生(Sheng)长(Chang)特(Te)性(Xing) 贴(Tie)壁(Bi)细(Xi)胞(Bao)

细(Xi)胞(Bao)形(Xing)态(Tai) 上(Shang)皮(Pi)细(Xi)胞(Bao)样(Yang)

生(Sheng)长(Chang)培(Pei)养(Yang)基(Ji) Leibovitz's L-15＋(?)20% FBS＋(?)1% P/S

推(Tui)荐(Jian)传(Chuan)代(Dai)比(Bi)例(Li) 1:2-1:4

推(Tui)荐(Jian)换(Huan)液(Ye)频(Pin)率(Lu) 2~3次(Ci)/周(Zhou)

冻(Dong)存(Cun)条(Tiao)件(Jian)

冻(Dong)存(Cun)液(Ye)：(?)55% 基(Ji)础(Chu)培(Pei)养(Yang)基(Ji)+40%FBS+5%DMSO

温(Wen)度(Du)：(?)液(Ye)氮(Dan)

培(Pei)养(Yang)条(Tiao)件(Jian)

气(Qi)相(Xiang)：(?)空(Kong)气(Qi)，(?)99%

温(Wen)度(Du)：(?)37℃(?)

保(Bao)藏(Cang)机(Ji)构(Gou) ATCC; HTB-27 ECACC; 92020423

细(Xi)胞(Bao)系(Xi)培(Pei)养(Yang)步(Bu)骤(Zhou)：(?)

细(Xi)胞(Bao)系(Xi)培(Pei)养(Yang)的(De)步(Bu)骤(Zhou)主(Zhu)要(Yao)包(Bao)括(Kuo)细(Xi)胞(Bao)复(Fu)苏(Su)、(?)细(Xi)胞(Bao)传(Chuan)代(Dai)和(He)细(Xi)胞(Bao)冻(Dong)存(Cun)。(?)

细(Xi)胞(Bao)复(Fu)苏(Su)：(?)

将(Jiang)冻(Dong)存(Cun)细(Xi)胞(Bao)从(Cong)液(Ye)氮(Dan)中(Zhong)取(Qu)出(Chu)后(Hou)，(?)在(Zai)37℃(?)水(Shui)浴(Yu)锅(Guo)内(Nei)不(Bu)断(Duan)摇(Yao)动(Dong)促(Cu)进(Jin)其(Qi)融(Rong)化(Hua)。(?)

将(Jiang)融(Rong)化(Hua)的(De)细(Xi)胞(Bao)移(Yi)入(Ru)离(Li)心(Xin)管(Guan)中(Zhong)，(?)加(Jia)入(Ru)37℃(?)预(Yu)热(Re)的(De)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)中(Zhong)（(?)其(Qi)中(Zhong)胎(Tai)牛(Niu)血(Xue)清(Qing)约(Yue)为(Wei)10%）(?)，(?)轻(Qing)轻(Qing)吹(Chui)匀(Yun)，(?)离(Li)心(Xin)，(?)500g离(Li)心(Xin)2min，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)。(?)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)清(Qing)洗(Xi)，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)。(?)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)轻(Qing)轻(Qing)吹(Chui)打(Da)混(Hun)匀(Yun)，(?)制(Zhi)成(Cheng)细(Xi)胞(Bao)悬(Xuan)液(Ye)，(?)接(Jie)种(Zhong)于(Yu)培(Pei)养(Yang)皿(Min)/瓶(Ping)中(Zhong)，(?)在(Zai)含(Han)5% CO2的(De)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)培(Pei)养(Yang)。(?)

细(Xi)胞(Bao)传(Chuan)代(Dai)：(?)

当(Dang)细(Xi)胞(Bao)密(Mi)度(Du)达(Da)到(Dao)80%~90%时(Shi)，(?)去(Qu)掉(Diao)培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)用(Yong)1X PBS清(Qing)洗(Xi)2次(Ci)。(?)

加(Jia)入(Ru)进(Jin)行(Xing)消(Xiao)化(Hua)，(?)放(Fang)入(Ru)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)约(Yue)2-3min。(?)

加(Jia)入(Ru)适(Shi)量(Liang)DME培(Pei)养(Yang)基(Ji)终(Zhong)止(Zhi)消(Xiao)化(Hua)，(?)转(Zhuan)移(Yi)至(Zhi)离(Li)心(Xin)管(Guan)后(Hou)500g离(Li)心(Xin)2min，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)，(?)再(Zai)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)清(Qing)洗(Xi)，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)。(?)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)轻(Qing)轻(Qing)吹(Chui)打(Da)混(Hun)匀(Yun)，(?)吸(Xi)取(Qu)10微(Wei)升(Sheng)进(Jin)行(Xing)计(Ji)数(Shu)，(?)然(Ran)后(Hou)按(An)照(Zhao)所(Suo)需(Xu)细(Xi)胞(Bao)量(Liang)在(Zai)含(Han)5% CO2的(De)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)继(Ji)续(Xu)培(Pei)养(Yang)。(?)

细(Xi)胞(Bao)冻(Dong)存(Cun)：(?)

当(Dang)细(Xi)胞(Bao)密(Mi)度(Du)达(Da)到(Dao)80%~90%时(Shi)，(?)去(Qu)掉(Diao)培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)用(Yong)1X PBS清(Qing)洗(Xi)2次(Ci)。(?)

加(Jia)入(Ru)行(Xing)消(Xiao)化(Hua)，(?)放(Fang)入(Ru)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)约(Yue)2-3min。(?)

加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)终(Zhong)止(Zhi)消(Xiao)化(Hua)，(?)转(Zhuan)移(Yi)至(Zhi)离(Li)心(Xin)管(Guan)后(Hou)500g离(Li)心(Xin)2min，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)，(?)再(Zai)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)清(Qing)洗(Xi)，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)。(?)

这(Zhe)些(Xie)步(Bu)骤(Zhou)确(Que)保(Bao)了(Liao)细(Xi)胞(Bao)的(De)生(Sheng)长(Chang)和(He)繁(Fan)殖(Zhi)能(Neng)够(Gou)在(Zai)体(Ti)外(Wai)环(Huan)境(Jing)中(Zhong)得(De)到(Dao)有(You)效(Xiao)的(De)维(Wei)持(Chi)和(He)扩(Kuo)展(Zhan)，(?)为(Wei)科(Ke)学(Xue)研(Yan)究(Jiu)提(Ti)供(Gong)了(Liao)大(Da)量(Liang)的(De)细(Xi)胞(Bao)样(Yang)本(Ben)。(?)

细(Xi)胞(Bao)系(Xi)培(Pei)养(Yang)的(De)步(Bu)骤(Zhou)主(Zhu)要(Yao)包(Bao)括(Kuo)细(Xi)胞(Bao)复(Fu)苏(Su)、(?)细(Xi)胞(Bao)传(Chuan)代(Dai)和(He)细(Xi)胞(Bao)冻(Dong)存(Cun)。(?)

细(Xi)胞(Bao)复(Fu)苏(Su)：(?)

将(Jiang)冻(Dong)存(Cun)细(Xi)胞(Bao)从(Cong)液(Ye)氮(Dan)中(Zhong)取(Qu)出(Chu)后(Hou)，(?)在(Zai)37℃(?)水(Shui)浴(Yu)锅(Guo)内(Nei)不(Bu)断(Duan)摇(Yao)动(Dong)促(Cu)进(Jin)其(Qi)融(Rong)化(Hua)。(?)

将(Jiang)融(Rong)化(Hua)的(De)细(Xi)胞(Bao)移(Yi)入(Ru)离(Li)心(Xin)管(Guan)中(Zhong)，(?)加(Jia)入(Ru)37℃(?)预(Yu)热(Re)的(De)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)中(Zhong)（(?)其(Qi)中(Zhong)胎(Tai)牛(Niu)血(Xue)清(Qing)约(Yue)为(Wei)10%）(?)，(?)轻(Qing)轻(Qing)吹(Chui)匀(Yun)，(?)离(Li)心(Xin)，(?)500g离(Li)心(Xin)2min，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)。(?)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)清(Qing)洗(Xi)，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)。(?)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)轻(Qing)轻(Qing)吹(Chui)打(Da)混(Hun)匀(Yun)，(?)制(Zhi)成(Cheng)细(Xi)胞(Bao)悬(Xuan)液(Ye)，(?)接(Jie)种(Zhong)于(Yu)培(Pei)养(Yang)皿(Min)/瓶(Ping)中(Zhong)，(?)在(Zai)含(Han)5% CO2的(De)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)培(Pei)养(Yang)。(?)

细(Xi)胞(Bao)传(Chuan)代(Dai)：(?)

当(Dang)细(Xi)胞(Bao)密(Mi)度(Du)达(Da)到(Dao)80%~90%时(Shi)，(?)去(Qu)掉(Diao)培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)用(Yong)1X PBS清(Qing)洗(Xi)2次(Ci)。(?)

加(Jia)入(Ru)进(Jin)行(Xing)消(Xiao)化(Hua)，(?)放(Fang)入(Ru)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)约(Yue)2-3min。(?)

加(Jia)入(Ru)适(Shi)量(Liang)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)终(Zhong)止(Zhi)消(Xiao)化(Hua)，(?)转(Zhuan)移(Yi)至(Zhi)离(Li)心(Xin)管(Guan)后(Hou)500g离(Li)心(Xin)2min，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)，(?)再(Zai)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)清(Qing)洗(Xi)，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)。(?)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)轻(Qing)轻(Qing)吹(Chui)打(Da)混(Hun)匀(Yun)，(?)吸(Xi)取(Qu)10微(Wei)升(Sheng)进(Jin)行(Xing)计(Ji)数(Shu)，(?)然(Ran)后(Hou)按(An)照(Zhao)所(Suo)需(Xu)细(Xi)胞(Bao)量(Liang)在(Zai)含(Han)5% CO2的(De)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)继(Ji)续(Xu)培(Pei)养(Yang)。(?)

细(Xi)胞(Bao)冻(Dong)存(Cun)：(?)

当(Dang)细(Xi)胞(Bao)密(Mi)度(Du)达(Da)到(Dao)80%~90%时(Shi)，(?)去(Qu)掉(Diao)培(Pei)养(Yang)基(Ji)，(?)用(Yong)1X PBS清(Qing)洗(Xi)2次(Ci)。(?)

加(Jia)入(Ru)进(Jin)行(Xing)消(Xiao)化(Hua)，(?)放(Fang)入(Ru)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)约(Yue)2-3min。(?)

加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)终(Zhong)止(Zhi)消(Xiao)化(Hua)，(?)转(Zhuan)移(Yi)至(Zhi)离(Li)心(Xin)管(Guan)后(Hou)500g离(Li)心(Xin)2min，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)，(?)再(Zai)加(Jia)入(Ru)DMEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)清(Qing)洗(Xi)，(?)弃(Qi)上(Shang)清(Qing)液(Ye)。(?)

这(Zhe)些(Xie)步(Bu)骤(Zhou)确(Que)保(Bao)了(Liao)细(Xi)胞(Bao)的(De)生(Sheng)长(Chang)和(He)繁(Fan)殖(Zhi)能(Neng)够(Gou)在(Zai)体(Ti)外(Wai)环(Huan)境(Jing)中(Zhong)得(De)到(Dao)有(You)效(Xiao)的(De)维(Wei)持(Chi)和(He)扩(Kuo)展(Zhan)，(?)为(Wei)科(Ke)学(Xue)研(Yan)究(Jiu)提(Ti)供(Gong)了(Liao)大(Da)量(Liang)的(De)细(Xi)胞(Bao)样(Yang)本(Ben)

细(Xi)胞(Bao)接(Jie)收(Shou)后(Hou)的(De)处(Chu)理(Li)：(?)

1）(?)MDA-MB-361人(Ren)乳(Ru)腺(Xian)癌(Ai)细(Xi)胞(Bao)细(Xi)胞(Bao)系(Xi)收(Shou)到(Dao)细(Xi)胞(Bao)后(Hou)，(?)75%酒(Jiu)精(Jing)瓶(Ping)壁(Bi)将(Jiang)T25瓶(Ping)置(Zhi)于(Yu)37℃(?)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)放(Fang)置(Zhi)约(Yue)2-3h，(?)若(Ruo)发(Fa)现(Xian)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)破(Po)损(Sun)、(?)有(You)液(Ye)溢(Yi)出(Chu)及(Ji)细(Xi)胞(Bao)有(You)污(Wu)染(Ran)，(?)请(Qing)拍(Pai)照(Zhao)后(Hou)及(Ji)时(Shi)联(Lian)系(Xi)我(Wo)们(Men)。(?)

2）(?)请(Qing)在(Zai)4或(Huo)5X显(Xian)微(Wei)镜(Jing)下(Xia)确(Que)认(Ren)细(Xi)胞(Bao)状(Zhuang)态(Tai)，(?)同(Tong)时(Shi)给(Gei)刚(Gang)收(Shou)到(Dao)的(De)细(Xi)胞(Bao)拍(Pai)照(Zhao)（(?)10×(?)，(?)20×(?)）(?)各(Ge)2-3张(Zhang)以(Yi)及(Ji)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)外(Wai)观(Guan)照(Zhao)片(Pian)一(Yi)张(Zhang)留(Liu)存(Cun)，(?)作(Zuo)为(Wei)售(Shou)后(Hou)时(Shi)收(Shou)到(Dao)时(Shi)细(Xi)胞(Bao)状(Zhuang)态(Tai)的(De)依(Yi)据(Ju)

3）(?)贴(Tie)壁(Bi)细(Xi)胞(Bao)：(?)细(Xi)胞(Bao)在(Zai)37℃(?)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)放(Fang)置(Zhi)2-3h，(?)显(Xian)微(Wei)镜(Jing)下(Xia)观(Guan)察(Cha)细(Xi)胞(Bao)的(De)生(Sheng)长(Chang)和(He)贴(Tie)壁(Bi)情(Qing)况(Kuang)，(?)有(You)些(Xie)贴(Tie)壁(Bi)细(Xi)胞(Bao)在(Zai)快(Kuai)递(Di)运(Yun)送(Song)过(Guo)程(Cheng)中(Zhong)会(Hui)因(Yin)振(Zhen)动(Dong)脱(Tuo)落(Luo)和(He)脱(Tuo)落(Luo)后(Hou)成(Cheng)团(Tuan)的(De)情(Qing)况(Kuang)。(?)若(Ruo)镜(Jing)下(Xia)观(Guan)察(Cha)细(Xi)胞(Bao)的(De)生(Sheng)长(Chang)密(Mi)度(Du)若(Ruo)在(Zai)60%以(Yi)下(Xia)，(?)可(Ke)去(Qu)除(Chu)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)中(Zhong)灌(Guan)液(Ye)培(Pei)养(Yang)基(Ji)（(?)若(Ruo)有(You)未(Wei)贴(Tie)壁(Bi)的(De)细(Xi)胞(Bao)需(Xu)要(Yao)离(Li)心(Xin)回(Hui)收(Shou)，(?)重(Zhong)悬(Xuan)打(Da)入(Ru)到(Dao)原(Yuan)培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)中(Zhong)）(?),加(Jia)入(Ru)新(Xin)配(Pei)制(Zhi)的(De)培(Pei)养(Yang)基(Ji)6-8mL，(?)放(Fang)到(Dao)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)中(Zhong)继(Ji)续(Xu)培(Pei)养(Yang)。(?)若(Ruo)细(Xi)胞(Bao)生(Sheng)长(Chang)密(Mi)度(Du)达(Da)70%-80%以(Yi)上(Shang)，(?)可(Ke)以(Yi)对(Dui)细(Xi)胞(Bao)进(Jin)行(Xing)传(Chuan)代(Dai)处(Chu)理(Li)。(?)传(Chuan)代(Dai)过(Guo)程(Cheng)中(Zhong)，(?)若(Ruo)因(Yin)运(Yun)输(Shu)振(Zhen)动(Dong)脱(Tuo)落(Luo)的(De)细(Xi)胞(Bao)需(Xu)要(Yao)离(Li)心(Xin)回(Hui)收(Shou)。(?)

4）(?)备(Bei)注(Zhu)：(?)运(Yun)输(Shu)用(Yong)的(De)培(Pei)养(Yang)基(Ji)（(?)灌(Guan)液(Ye)培(Pei)养(Yang)基(Ji)）(?)不(Bu)能(Neng)再(Zai)用(Yong)来(Lai)培(Pei)养(Yang)细(Xi)胞(Bao)，(?)请(Qing)换(Huan)用(Yong)按(An)照(Zhao)说(Shuo)明(Ming)书(Shu)细(Xi)胞(Bao)培(Pei)养(Yang)条(Tiao)件(Jian)新(Xin)配(Pei)制(Zhi)的(De)完(Wan)培(Pei)养(Yang)基(Ji)来(Lai)培(Pei)养(Yang)细(Xi)胞(Bao)。(?)  收(Shou)到(Dao)细(Xi)胞(Bao)后(Hou)次(Ci)传(Chuan)代(Dai)建(Jian)议(Yi)T25培(Pei)养(Yang)瓶(Ping)1：(?)2传(Chuan)代(Dai) 。(?)                      

一(Yi)．(?)培(Pei)养(Yang)基(Ji)及(Ji)培(Pei)养(Yang)冻(Dong)存(Cun)条(Tiao)件(Jian)准(Zhun)备(Bei)：(?)

1）(?) 准(Zhun)备(Bei)MEM培(Pei)养(Yang)基(Ji)；(?)胎(Tai)牛(Niu)血(Xue)清(Qing)，(?)10%；(?)双(Shuang)抗(Kang)，(?)1%。(?)

2）(?) 培(Pei)养(Yang)条(Tiao)件(Jian)：(?) 气(Qi)相(Xiang)：(?)空(Kong)气(Qi)，(?)95%；(?)二(?)氧(Yang)化(Hua)碳(Tan)，(?)5%。(?) 温(Wen)度(Du)：(?)37摄(She)氏(Shi)度(Du)，(?)培(Pei)养(Yang)箱(Xiang)湿(Shi)度(Du)为(Wei)70%-80%。(?)

3）(?) 冻(Dong)存(Cun)液(Ye)：(?)90%血(Xue)清(Qing)，(?)10%DMSO，(?)现(Xian)用(Yong)现(Xian)配(Pei)。(?)

公(Gong)司(Si)正(Zheng)在(Zai)出(Chu)售(Shou)的(De)产(Chan)品(Pin)：(?)